細(xì)菌性陰道病是陰道乳酸桿菌被另一組厭氧菌取代(如:陰道加特納菌、類桿菌等)后引起的一種陰道不適的臨床綜合征,常不為人們注意。近年國內(nèi)學(xué)者發(fā)現(xiàn)各種婦科手術(shù),盆腔炎和妊娠合并癥有關(guān),且可導(dǎo)致急性輸卵管炎,因此,應(yīng)引起人們的重視。目前實(shí)驗(yàn)室檢查細(xì)菌性陰道病的幾種方法。
1Amsel's金標(biāo)準(zhǔn)法(又稱臨床常規(guī)檢查方法)
即以下四項(xiàng)中有三項(xiàng)符合方可診斷:陰道pH值>4.5;根據(jù)有些專家研究的結(jié)果,陰道菌群正常的婦女在性交后或在月經(jīng)期也有陰道pH值升高現(xiàn)象,陰道分泌物中混有宮頸黏液也將產(chǎn)生較高的pH值。BV患者陰道pH值大于4.5。故以pH值>4.5為BV的指標(biāo);陰道分泌物增多、變稀呈奶狀、有異味;胺試驗(yàn)陽性,即在分泌物中加入KOH產(chǎn)生魚腥味;線索細(xì)胞檢查,此項(xiàng)檢查亦可在臨床做,亦可送化驗(yàn)室檢查,具體操作:取分泌物作生理鹽水濕片,見散在的上皮細(xì)胞及其間的細(xì)菌。上皮細(xì)胞表面有很多細(xì)菌,使其邊緣呈鋸齒狀而不清晰,形成所謂線索細(xì)胞(Cluecell)。如用美藍(lán)鹽水作濕片,細(xì)菌染成深藍(lán)色,易與乳酸桿菌區(qū)別。乳酸桿菌也會(huì)少量地粘附在上皮細(xì)胞上。在實(shí)際工作中準(zhǔn)確執(zhí)行上述標(biāo)準(zhǔn)并不容易,一些與感染無關(guān)的因素亦可導(dǎo)致陰道pH高或使分泌物產(chǎn)生異味,尤其在診斷線索細(xì)胞時(shí)可受顯微觀察設(shè)備的質(zhì)量、樣本采集及操作者經(jīng)驗(yàn)影響,在使用傳統(tǒng)的Amsel’s,金標(biāo)準(zhǔn)法可造成BV漏診,而線索細(xì)胞檢測(cè)是單項(xiàng)BV臨床化驗(yàn)的最有特異性的,但碎片及退化的細(xì)胞有時(shí)被誤認(rèn)為是線索細(xì)胞。Eschenach等指出至少有陰道上皮有線索細(xì)胞存在,才能判定為陽性結(jié)果。
2胺試驗(yàn)(檢測(cè)卡或試紙條)
常規(guī)的胺試驗(yàn)客觀性差,靈敏度低,受實(shí)驗(yàn)人員嗅覺功能影響大,隨著技術(shù)進(jìn)步,目前胺試驗(yàn)與包被有顏色指示劑的膜有機(jī)結(jié)合,克服了以上弊端,使結(jié)果更客觀有效。本試驗(yàn)中氨的產(chǎn)生是由于陰道加特納菌和厭氧菌協(xié)同產(chǎn)生幾種氨而非乳酸,這些氨在高pH條件下,容易揮發(fā)而產(chǎn)生惡臭的腐氨和尸氨,近來有人提出好動(dòng)月牙桿菌可提供一種特殊的脫羧酶,此酶可使BV婦女存在的高濃度三甲基胺氧化物生成三甲胺,Broad提出三甲基胺是BV魚腥臭的主要物質(zhì),聚胺引起陰道黏膜上皮細(xì)胞的剝脫,而使陰道分泌物異常。林英(1993年)報(bào)道,粘附于剝脫的線索細(xì)胞上的微生物主要是陰道加特納菌,其次是好動(dòng)月牙桿菌。胺試驗(yàn)方法首先由Pheifer等,在1978年提出。把KOH加入BV婦女的陰道分泌物標(biāo)本中,BV病原菌可釋放丁二胺、戊二胺、三甲胺等揮發(fā)性胺而產(chǎn)生氨味。某些BV婦女在性交后陰道惡臭味更加強(qiáng)烈,這可能是因?yàn)榫旱膒H值較高,發(fā)揮與KOH相同的作用產(chǎn)生了氨味。腐氨也存在精液中,對(duì)氣味敏感而無BV的婦女會(huì)注意到這種氣味,所以胺試驗(yàn)的假陽性可發(fā)生在近期有性行為的婦女,該方法屬于輔助診斷試驗(yàn)。
3唾液酸酶法和脯氨酸氨肽酶法
唾液酸酶法機(jī)制為:正常陰道中有少量厭氧菌生長,厭氧菌與需氧菌的比例為1∶2~1∶5,患BV時(shí)厭氧菌與需氧菌的比例為200∶1~1000∶1,而唾液酸酶的活性與厭氧菌的數(shù)量有關(guān),正常人陰道中唾液酸酶活性極低,唾液酸酶法測(cè)不出,因此唾液酸酶法測(cè)定時(shí)不變色,患BV時(shí)唾液酸酶活性大大增加,甚至可達(dá)正常40多倍,測(cè)定時(shí)變色。另有研究表明,感染BV時(shí)陰道分泌物中脯氨酸氨肽酶活力明顯升高。該檢測(cè)法的不足之處為唾液酸酶在腫瘤細(xì)胞中活性增強(qiáng),生殖道腫瘤可導(dǎo)致假陽性;另外陰道內(nèi)一些細(xì)菌和滴蟲也產(chǎn)生脯氨酸氨肽酶,感染這些生物也可造成酶活力升高導(dǎo)致假陽性。
4婦科白帶涂片多項(xiàng)檢查快速染色技術(shù)
是根據(jù)白帶中病原體具有不同形態(tài)特點(diǎn)采用具多功能的染液在一張玻片上同時(shí)作滴蟲、念珠菌、纖毛菌、淋球菌、加特納球桿菌、核異質(zhì)細(xì)胞、癌細(xì)胞等多項(xiàng)檢測(cè),由于其方法簡(jiǎn)便,染色時(shí)間短暫,染色結(jié)構(gòu)清晰、形態(tài)標(biāo)準(zhǔn),病原體檢出率較高,給臨床提供了可靠的診斷依據(jù)。其一片多用功能減少了日常工作中多項(xiàng)標(biāo)本處理不便的弊病。線索細(xì)胞系大量加特納菌附著于陰道脫落鱗狀上皮細(xì)胞的表面,如一層細(xì)沙均勻覆蓋。它不同于乳酸桿菌吸附在陰道脫落鱗狀上皮細(xì)胞表面,區(qū)別主要在于細(xì)胞邊緣的清晰度,線索細(xì)胞常呈斑點(diǎn)狀、鋸齒狀、顆粒狀外觀且邊緣模糊不清。CTB染色技術(shù)的應(yīng)用彌補(bǔ)了傳統(tǒng)方法的不足,多種病原體檢出是一種較簡(jiǎn)便、快捷的篩選檢驗(yàn)方法,為臨床婦產(chǎn)科醫(yī)師對(duì)癥下藥提供了快速、準(zhǔn)確的診斷依據(jù)。